Πληροφορίες

Εργαστήριο 2: Ασηπτική Τεχνική – Βιολογία

Εργαστήριο 2: Ασηπτική Τεχνική – Βιολογία


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Θα εργάζεστε με πολλά παθογόνα είδη βακτηρίων στο εργαστήριο. Να θυμάστε ότι τα βακτήρια βρίσκονται στον αέρα καθώς και στο δέρμα, στον πάγκο και σε όλα τα αντικείμενα και τον εξοπλισμό που δεν έχουν αποστειρωθεί. Το πιο σημαντικό εργαλείο για τη μεταφορά καλλιεργειών είναι η βελόνα ή θηλιά εμβολιασμού με σύρμα. Μπορεί να αποστειρωθεί γρήγορα θερμαίνοντάς το σε κόκκινο καυτό σε φλόγα καυστήρα Bunsen. Ρυθμίστε τις εισαγωγές αέρα του καυστήρα έτσι ώστε να υπάρχει ένας πιο ζεστός εσωτερικός κώνος και η πιο δροσερή εξωτερική φλόγα. Μια στεγνή βελόνα μπορεί να αποστειρωθεί κρατώντας τη σε γωνία 30 μοιρών στο εξωτερικό μέρος της φλόγας. Ένας βρεγμένος βρόχος με βακτήρια πάνω του πρέπει πρώτα να κρατηθεί στο εσωτερικό μέρος της φλόγας για να αποφευχθεί το πιτσίλισμα και στη συνέχεια να θερμανθεί μέχρι να κοκκινίσει στο εξωτερικό μέρος της φλόγας. Πάντα να καίτε τη θηλιά αμέσως πριν και μετά τη χρήση! Αφήστε το να κρυώσει πριν συλλέξετε ένα εμβόλιο βακτηρίων (ή θα σκοτώσετε τα βακτήρια). Κρατήστε τη θηλιά ή τη συρμάτινη λαβή σαν μολύβι.

Θυμάμαι να:

1. Πάντα να στέκεστε ή να μεταφέρετε τους σωλήνες σε ένα ράφι.

2. Μην αφήνετε το καπάκι κάτω και μην αγγίζετε τίποτα μαζί του.

3. Μην αφαιρείτε το καπάκι άσκοπα ή για παρατεταμένες χρονικές περιόδους.

4. Βάζετε πάντα το καπάκι των πιάτων με την όψη προς τα κάτω.

Πώς να κάνετε ράβδωση για απομονωμένες αποικίες (SFIC):

Μικτές καλλιέργειες (περισσότερα από ένα είδη) μπορούν να απομονωθούν χρησιμοποιώντας την τεχνική της πλάκας ραβδώσεων. Ο στόχος είναι να αποκτήσουμε μια καθαρή καλλιέργεια ενός είδους βακτηρίων, σε μία μόνο αποικία, από μια μικτή καλλιέργεια. Αυτό το κάνουμε διαχωρίζοντας τα μικρόβια στην επιφάνεια του άγαρ με ραβδώσεις τεταρτημορίου, αυτή η μέθοδος ΑΡΑΙΩΝΕΙ τα βακτήρια. Ο στόχος δεν είναι να υπάρχουν βακτήρια και στα τέσσερα τεταρτημόρια, αλλά μάλλον να αποκτηθούν μεμονωμένες απομονωμένες αποικίες.

Ασκηση

Εξασκηθείτε στο SFIC χρησιμοποιώντας το μολύβι σας αντί για τον βρόχο. Μόλις βάλετε το μολύβι σας στο «πιάτο», μην το σηκώσετε ξανά. Βεβαιωθείτε ότι ανάβει ανάμεσα σε κάθε τεταρτημόριο.

Διαφορετικοί τύποι μέσων για την ανάπτυξη βακτηρίων:

SLANT: στερεό μέσο φτιαγμένο με άγαρ και διάφορα θρεπτικά συστατικά και δείκτες. Η κλίση δίνει στα βακτήρια μια μεγαλύτερη επιφάνεια στην οποία μπορούν να αναπτυχθούν σε ένα σωλήνα. Τα λοξά άγαρ είναι επίσης χρήσιμα για τη διατήρηση των βακτηριακών καλλιεργειών, περισσότερο από ό,τι οι στοίβες των πιάτων Petri. Πολλαπλές καλλιέργειες τοποθετούνται εύκολα σε ράφια δοκιμαστικών σωλήνων και αποθηκεύονται στο ψυγείο. Τα βακτήρια ενοφθαλμίζονται σε μια κλίση χρησιμοποιώντας ένα βρόχο και αναπτύσσονται στην επιφάνεια του άγαρ.

SLANT/DEEP: στερεό μέσο φτιαγμένο με άγαρ και διάφορα θρεπτικά συστατικά και δείκτες. Παρόμοιο με μια κλίση, αλλά δημιουργεί μια βαθιά ζώνη, που συνήθως ονομάζεται "πισινό". Αυτός ο τύπος μέσου καλλιέργειας δίνει την ικανότητα να αναπτύσσονται βακτήρια τόσο σε αερόβιο, πλούσιο σε οξυγόνο, περιβάλλον (επιφάνεια κλίσης) όσο και σε αναερόβιο περιβάλλον με έλλειψη οξυγόνου (κλίση). Η κλίση/βαθιά ενοφθαλμίζεται με το μαχαίρι μιας βελόνας στον πισινό και στη συνέχεια αμέσως με ραβδώσεις στην επιφάνεια της κλίσης.

ΒΑΘΙΟ: στερεό μέσο φτιαγμένο με άγαρ και διάφορα θρεπτικά συστατικά και δείκτες. Αυτός ο τύπος καλλιέργειας χρησιμοποιείται για την ανάπτυξη αναερόβιων βακτηρίων τα οποία αναπτύσσονται απουσία οξυγόνου και εμβολιάζονται με μαχαίρι του μέσου με βελόνα.

ΖΩΜΟΣ: υγρό μέσο φτιαγμένο με διάφορα θρεπτικά συστατικά και δείκτες. Επιτρέπει την ανάπτυξη μεγάλων όγκων βακτηρίων, το επίπεδο ανάπτυξης μπορεί να εκτιμηθεί με βάση τη θολότητα (θολότητα) της καλλιέργειας. Τα βακτήρια εμβολιάζονται σε ζωμό χρησιμοποιώντας βρόχο.

BROTH+DURHAM TUBE: υγρό μέσο κατασκευασμένο με διάφορα θρεπτικά συστατικά και δείκτες στο οποίο τοποθετείται ένα ανάποδα μικρότερο σωληνάριο, που ονομάζεται σωλήνας Durham. Οι σωλήνες Durham χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση της παραγωγής αερίων, όπως CO2 ή N2, από μικροοργανισμούς. Ο σωλήνας αρχικά γεμίζει με το μέσο και στη συνέχεια συλλέγει αέριο καθώς αναπτύσσονται τα βακτήρια, δημιουργώντας μια φυσαλίδα. Τα βακτήρια εμβολιάζονται σε ένα σωληνάριο ζωμού+Durham χρησιμοποιώντας βρόχο.

ΠΙΑΤΟ: στερεό μέσο φτιαγμένο με άγαρ και διάφορα θρεπτικά συστατικά και δείκτες. Μπορεί να γίνει σε πιάτα Petri διαφόρων μεγεθών. Οι πλάκες είναι ιδιαίτερα χρήσιμες στην απομόνωση ενός συγκεκριμένου είδους βακτηρίων, κάτι που δεν είναι δυνατό σε ένα υγρό μέσο. Χρησιμοποιώντας την τεχνική SFIC τα βακτήρια μπορούν να αραιωθούν μέχρι να σχηματιστούν μεμονωμένες αποικίες. Τα βακτήρια ενοφθαλμίζονται σε μια πλάκα χρησιμοποιώντας ένα βρόχο

Σημείωση

Λάβετε υπόψη ότι ένας βρόχος θα συλλέξει πολύ υψηλότερες συγκεντρώσεις βακτηρίων από ένα πιάτο παρά από ένα ζωμό. Επομένως, όταν χρησιμοποιείτε την τεχνική SFIC, σκεφτείτε από ποιο μέσο/μέσο παίρνετε τα βακτήρια.

Άσηπτη μεταφορά βακτηρίων:

ΓΙΑ ΑΥΤΟ ΤΟ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΘΑ ΔΟΥΛΕΥΕΤΕ ΑΤΟΜΙΚΑ

1. Θα σας χορηγηθεί Staphylococus epidermidis σε ζωμό και σε πιάτο. Αυτά θα μοιράζονται με το τραπέζι και θα βρίσκονται στο μπροστινό μέρος κάθε τραπεζιού σε ένα λευκό πλαστικό ράφι.

2. Επισημάνετε 2 σωλήνες ζωμού, 2 λοξούς σωλήνες και 2 πλάκες.

3. Μεταφέρετε άσηπτα βακτήρια από την καλλιέργεια BROTH σε ένα ζωμό, μια κλίση και ένα πιάτο χρησιμοποιώντας τη θηλιά σας.

Σημείωση

Θα γίνει ένα τεστ δεξιοτήτων για το SFIC και και μελλοντικές επιπλέον ευκαιρίες πίστωσης θα βασιστούν σε αυτήν την τεχνική, βεβαιωθείτε ότι γνωρίζετε πώς να το κάνετε!!

4. Μεταφέρετε άσηπτα βακτήρια από την καλλιέργεια PLATE σε ένα ζωμό, μια κλίση και ένα πιάτο

5. Οι πλάκες θα τοποθετηθούν στον επωαστήρα 37°C στο δοχείο που φέρει την ετικέτα με το τμήμα του εργαστηρίου σας. Όλοι οι σωλήνες θα τοποθετηθούν στα παρεχόμενα ράφια στο τέλος του τραπεζιού σας. Όταν τελειώσει το τραπέζι σας, κάποιος από εσάς θα χρειαστεί να τοποθετήσει αυτό το ράφι στη θερμοκοιτίδα 37°C. (αν έχετε διαβάσει μέχρι το τελευταίο βήμα πριν ξεκινήσετε τον εμβολιασμό, γράψτε το όνομά σας σε ένα post-it και φέρτε το στον εκπαιδευτή για 1 πόντο επιπλέον πίστωση)

Βακτηριακό σχήμα και διάταξη:

Τα βακτήρια περιγράφονται με τρία βασικά κριτήρια: μέγεθος, σχήμα και διάταξη. Οι μονάδες που χρησιμοποιούνται για τη μέτρηση των οργανισμών που φαίνονται στο μικροσκόπιο είναι τα μικρόμετρα (μm). Ένα μικρόμετρο είναι το ένα εκατομμυριοστό του μέτρου. Τα περισσότερα μικρόβια έχουν μέγεθος περίπου 1 μm. Οι ιοί έχουν συνήθως το 1/10 αυτού του μεγέθους. Τα ζωικά κύτταρα έχουν συνήθως μέγεθος περίπου 10 μm. Τα τρία πιο κοινά σχήματα είναι η ράβδος (βάκιλος), η σφαίρα (κόκκος) και ο σπειροειδής τύπος (vibrio).

Η διάταξη είναι ο τρόπος με τον οποίο ομάδες βακτηρίων εμφανίζονται μαζί. Μερικοί συνήθεις τύποι διάταξης είναι ζευγαρωμένα (diplo), συστάδες που μοιάζουν με σταφύλι (staphylo) ή αλυσίδες (strepto).


Τι είναι η άσηπτη τεχνική

Η άσηπτη τεχνική είναι το φάσμα των πρακτικών πρόληψης και ελέγχου των λοιμώξεων που χρησιμοποιούνται για την ελαχιστοποίηση της παρουσίας παθογόνων μικροοργανισμών κατά τη διάρκεια κλινικών διαδικασιών. Προηγουμένως, οι όροι «στείρα τεχνική», «καθαρή τεχνική» και «άσηπτη τεχνική» χρησιμοποιούνταν εναλλακτικά. Η σωστή ορολογία και πρακτική είναι η «άσηπτη τεχνική». Η «άσηπτη τεχνική» στοχεύει στην πρόληψη της εισαγωγής παθογόνων μικροοργανισμών στον ασθενή μέσω των χεριών, των επιφανειών και του εξοπλισμού. Η άσηπτη τεχνική χρησιμοποιείται κατά τη διάρκεια κλινικών διαδικασιών για τον εντοπισμό και την πρόληψη της μικροβιακής μόλυνσης ασηπτικών τμημάτων και θέσεων διασφαλίζοντας ότι δεν αγγίζονται είτε άμεσα είτε έμμεσα. Η άσηπτη τεχνική προστατεύει τους ασθενείς κατά τη διάρκεια επεμβατικών κλινικών διαδικασιών χρησιμοποιώντας μέτρα ελέγχου λοιμώξεων που ελαχιστοποιούν, όσο είναι πρακτικά δυνατό, την παρουσία παθογόνων οργανισμών. Μια ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος ασηπτικής τεχνικής είναι γνωστή ως Aseptic Non Touch Technique (ANTT®). Η άσηψη επιτυγχάνεται με την προστασία των βασικών εξαρτημάτων και των σημείων κλειδιών από μικροοργανισμούς που μεταφέρονται από τον εργαζόμενο στον τομέα της υγείας και το άμεσο περιβάλλον. Για παράδειγμα, κατά την εφαρμογή ή την αλλαγή επιδέσμων, χρησιμοποιείται μια άσηπτη τεχνική προκειμένου να αποφευχθεί η εισαγωγή λοιμώξεων σε ένα τραύμα 1) . Ακόμα κι αν ένα τραύμα έχει ήδη μολυνθεί, θα πρέπει να χρησιμοποιηθεί μια άσηπτη τεχνική καθώς είναι σημαντικό να μην εισαχθεί περαιτέρω μόλυνση. Η άσηπτη τεχνική πρέπει να χρησιμοποιείται όταν ο ασθενής έχει χειρουργική ή μη χειρουργική πληγή μέσα ή γύρω από το μάτι.

Μερικά παραδείγματα διαδικασιών που απαιτούν άσηπτη τεχνική περιλαμβάνουν:

  • παρασκευή και χορήγηση ενδοφλέβιας (IV) υγρών ή φαρμάκων
  • απλοί ή σύνθετοι επίδεσμοι τραυμάτων
  • εισαγωγή ουροποιητικών καθετήρων
  • εισαγωγή ενδοφλέβιας (IV) κάνουλας ή κεντρικού φλεβικού καθετήρα (CVC)
  • άδειασμα ή αλλαγή σακουλών αποστράγγισης

Τα έξι βασικά στοιχεία της ασηπτικής τεχνικής από την Aseptic Non Touch Technique (ANTT®):

  1. Υγιεινή χεριών: αυστηρή τήρηση του αποτελεσματικού καθαρισμού των χεριών, με χρήση συστηματικής μεθόδου, που πραγματοποιείται πριν, κατά τη διάρκεια, εάν απαιτείται μετά από μόλυνση και μετά από επεμβατικές κλινικές διαδικασίες 2)
  2. Σωστή χρήση γαντιών: κατάλληλη χρήση γαντιών και άλλου εξοπλισμού ατομικής προστασίας για τη μείωση της μετάδοσης επιβλαβών μικροοργανισμών 3)
  3. Προστασία Key-Part και Key-Site: μέθοδος αναγνώρισης και αυστηρής μη επαφής και προστασίας από μόλυνση από την αφή των πιο κρίσιμων μερών του εξοπλισμού διαδικασίας 4)
  4. Τεχνική χωρίς άγγιγμα: την ικανότητα να μην αγγίζετε κανένα κρίσιμο μέρος(α) ή σημείο(α) μιας επεμβατικής κλινικής διαδικασίας 5)
  5. Απολύμανση βασικού εξαρτήματος: την απολύμανση των πιο κρίσιμων τμημάτων του εξοπλισμού διαδικασίας που θα μπορούσαν να παρέχουν σημείο εισόδου για επιβλαβείς μικροοργανισμούς 6)
  6. Διαχείριση ασηπτικών πεδίων: επιλογή κατάλληλων τύπων ασηπτικών πεδίων για την προστασία των βασικών εξαρτημάτων του εξοπλισμού διαδικασίας πριν και κατά τη διάρκεια των επεμβατικών κλινικών διαδικασιών 7)

Βασικοί ιστότοποι είναι τυχόν παραβιάσεις της ακεραιότητας του δέρματος που θα μπορούσαν να αποτελέσουν πύλη εισόδου μικροοργανισμών για να αποικίσουν τον ασθενή. Αυτό περιλαμβάνει τραύματα και σημεία παρακέντησης.

Βασικά μέρη είναι οποιαδήποτε μέρη του εξοπλισμού που έρχονται σε επαφή με τον διαδικαστικό εξοπλισμό ή τον ασθενή. Αυτό περιλαμβάνει επεμβατικές συσκευές που συνδέονται με τον ασθενή και εγχύσεις υγρών. Τα παραδείγματα περιλαμβάνουν:

Εάν τα βασικά μέρη μολυνθούν, μπορούν να μεταφέρουν μικροοργανισμούς στον ασθενή.

Ποιος είναι ο σκοπός της ασηπτικής τεχνικής;

Η άσηπτη τεχνική είναι μια σημαντική ικανότητα πρόληψης λοιμώξεων για την προστασία των ασθενών από λοιμώξεις που σχετίζονται με την υγειονομική περίθαλψη 8) .


Δες το βίντεο: Βιολογία Γ γυμνασίου - Ομοιοσταση (Φεβρουάριος 2023).